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Morfometria das fibras do miocárdio em fetos de rato estagiados (Rattus norvegicus).

Morphometry of ventricular myocard fibers in staged rat fetuses (Rattus norvegicus)

Margareth Costa-Neves & Ronald de M. S. Rega
CRBM 2638
Resumo: Foi analisado morfometricamente os diâmetros citoplasmático e nuclear em 120 células de miocárdio de fetos de rato (Rattus norvegicus) nos estágios de 28 à 31. Nossos resultados demostraram que a relação núcleo/citoplasma se manteve praticamente constante (N/C = 0.61); com os diâmetros nuclear variando entre 4,36 um e 9,70 um e citoplasmático entre 6.30 um e 15,27 um. O coeficiente de correlação entre o núcleo e o citoplasma de r = 0,685 com t de 3,26 (P<0,01).
Palavras-chaves: Morfometria, miocárdio, rato.
Abstract: It was morphometrically analized the cytoplasmatic and nuclear diameters of 120 cells from myocard of rat fetuses (Rattus norvegicus) between 28 and 31 stages. Our results showed that nucleus/cytoplasm is constant (N/C = 0.61) with nuclear diameters between 4.36 um to 9.70 um and cytoplasm diameters between 6.30 um to 15.27 um. The correlation coefficient between nucleus and cytoplasm was r = 0.685 with t-test 3.26 (p<0.01).
Key words: Morphometry, myocard, rat.
Introdução:
A morfometria celular normal e patológica do coração tem despertado o interesse de muitos pesquisadores nas últimas décadas, visto que, o seu conhecimento poderá ser importante para a análise de biópsias que visam diagnosticar doenças cardíacas ainda na vida uterina. Sandritter (1974)(1) afirma que na hipertrofia as fibras miocárdicas são três vezes mais grossas e os núcleos 50% menores. Mall et al (1982)(2) verificou em seu trabalho com indivíduos cardiopatas que as fibras cardíacas aumentam 20% o seu diâmetro. Segundo Oparil et al (1984)(3), o crescimento cardíaco dos vertebrados durante o período fetal é caracterizado pela hiperplasia das fibras musculares e a transição para a hipertrofia está relacionada com o aparecimento das células miocárdicas binucleadas. Este trabalho teve o propósito de analisar os diâmetros normais citoplasmáticos e nucleares de fibras miocárdicas em fetos de rato nos estágios 28 a 31.

Material e Métodos:
Quarenta e nove corações de fetos de rato (Rattus norvegicus albinus, variedade Wistar), provenientes do cruzamento de vários indivíduos não consangüíneos, com idades variando entre 20,0 e 21,5 dias pós-concepção

(estágios 28 à 31 da Carnegie Institution of Washington) foram utilizados no estudo dos diâmetros nuclear e citoplasmático de fibras do miocárdio ventricular. As ratas que apresentavam condições patológicas óbvias foram excluídos deste estudo.
As fêmeas grávidas foram sacrificadas por inalação de éter sulfúrico sendo em seguida histerectomizadas e os fetos retirados, medidos (comprimento vértice-cóccix -mm), pesados (g) e por fim colocados em solução fixadora de Bouin por 72 horas.
Os corações de todos os animais foram retirados e desidratados em álcool, diafanizados em benzol para inclusão em parafina. Os blocos foram cortados com 7 micrômetros de espessura e os cortes, corados pela hematoxilina-eosina (HE) para observação ao microscópio de luz.
O material histológico foi dividido em grupos por estágios: estágio 28 (N1C1); estágio 29 (N2C2); estágio 30 (N3C3) e estágio 31 (N4C4). As células foram escolhidas randomicamente em cada estágio, perfazendo um total de 120 células. Os diâmetros nuclear e citoplasmático foram aferidos sempre pelo mesmo observador com o auxílio de uma ocular graduada em microscópio óptico com objetiva de imersão, proporcionando um aumento de 1250X.
Para comparar os resultados morfométricos entre os grupos empregou-se o teste t de student e análise de variância. A análise estatística dos dados ainda constou: a) média dos diâmetros citoplasmático e nuclear; b) erro padrão da média; c) coeficiente de variação; d) coeficiente de correlação entre os diâmetros citoplasmático e nuclear e e) regressão linear da correlação.

Resultados e Discussão:
Os resultados do estudo da relação núcleo/citoplasma no coração de feto de rato (Rattus norvegicus albinus, variedade Wistar) estão indicados nas tabelas I e II.
Nossos resultados demonstraram que a relação núcleo/citoplasma foi mantida praticamente constante durante os estágios 28 a 31 do período fetal (NC = 0,61) correspondendo quase ao dobro da relação núcleo/citoplasma encontrado nas células dos músculos papilares anterior direito e esquerdo em adultos humanos(4). Em relação à média do diâmetro citoplasmático, nossos dados (10,83 um) foram menores do que as médias encontradas por ASHLEY 1945(5) e TRUEX 1972-74(6-7) 20,15 um; 15,80 um e 17,50 um respectivamente; porém foram semelhantes às médias obtidos por BISHOP & DRUMMOND 1979(8) e MANDARIM-DE-LACERDA